说到HPV检测标准，HC2技术？没错。

但我们今天聊的是HPV分型的标准。

Luminex技术，是的。

凭什么？

随着HPV感染和宫颈肿瘤之间的直接因果关系被证实，HPV检测已经成为宫颈癌防治的重要部分。HPV DNA检测以其高敏感性、高阴性预测值等特点，在预防宫颈癌上发挥重大的作用，提供更多的保护。从检测的型别来看，HPV检测主要有以下4种：

数十年的发展，随着对HPV认识与研究的深入，HPV检测从不分型到16/18部分分型，16/18部分分型到拓展分型，再到全分型，同时也满足不同区域，不同人种在型别上的差异。
2015年，全球商业化HPV核酸检测试剂超过193个[1]；
2020年，仅在我国获得NMPA认证的HPV核酸检测试剂就有88个（效期内）。
HPV检测试剂众多，方法学各异，有荧光PCR法，流式荧光杂交，反向点杂交，等温扩增，芯片法，测序…，如何对不同方法学的HPV检测试剂进行验证，保证其检测结果的准确性，尤其是其分型的准确性。我们看看WHO的选择。

WHO HPV 实验室网络（WHO HPV Laboratory Network）

由WHO发起，比尔和梅琳达·盖茨基金会资助，其合作机构包括PATH（非政府卫生组织）、哈佛大学、IARC（国际癌症研究机构）、ICO（加泰罗尼亚癌症研究所）、日内瓦WHO等。

WHO HPV实验室网络（WHO HPV Laboratory Network）以“协调和标准化实验室检测程序，并在全世界建立一个HPV实验室网络”为目标之一，以支持对区域疾病负担进行一致的实验室评估，并监测HPV疫苗的性能。

2014年，全球参考实验室（Global Reference Laboratory，GRL）基于Luminex分型对PP（标准品）进行了预测试。
德国癌症研究中心作为外部实验室，同样采用Luminex分型技术对PP进行了再次预测试。

2017年，全球参考实验室（GRL）基于Luminex分型对PP进行了预测试。

为什么Luminex分型能够得到WHO的认可，作为HPV分型的国际标准，Luminex技术有何独特之处？我们来了解一下吧。

Luminex核心技术之一为xMAP技术。1997年，《临床化学》杂志刊登专文介绍Luminex xMAP技术，并将其誉为“真正的临床应用型生物芯片”。随后，运用Luminex xMAP技术进行临床诊断和基础研究成为生命科学研究领域的一大热点，相关的研究论文频频刊登在《临床化学》 《临床与诊断免疫学》 《临床微生物》 《基因组研究》 《蛋白质组研究》 《癌症》等国际权威学术杂志上。被国际业界专家评价为临床诊断的趋势性技术之一。
2005年11月，为表彰其对临床诊断技术进步做出的贡献，全球科技产业、行业研究的权威机构—Frost & Sullivan―授予xMAP技术“2005年度国际临床诊断技术革新大奖”，标志着 Luminex xMAP技术在国际临床诊断技术领域的地位得到了最具权威的认可。

     xMAP技术     

在国内又称为“液相悬浮芯片技术”、“多功能流式点阵技术”、“液相芯片分析技术”、“流式荧光检测技术”、“多功能多指标并行分析技术”、“（微球）悬浮阵列技术”等。

它有机整和了荧光编码微球技术、激光分析技术、流式细胞技术、高速数字信号处理技术、计算机运算法则等多项最新科技成果，具有自由组合、高通量、高速度、低成本、准确性高、重复性好、灵敏度高、线性范围广、无需洗涤、操作简便、在同一平台上即可完成蛋白质和核酸的检测等优点，代表着生命科学基础研究和医学诊断技术的发展方向。

其技术原理为用不同配比的两种颜色分类荧光染料将直径为5.6 微米的聚苯乙烯微球染成不同的荧光色，从而获得多达100种荧光编码的微球。把针对不同待测物的抗体分子或者基因探针以共价交联的方式结合到特定的编码微球上，每个编码微球都对应相应的检测项目。先把针对不同待测物的荧光编码微球混合，然后加入待测物质或者待测的扩增片段，所形成的复合物再与标记荧光素发生结合反应。

微球在流动鞘液的带动下单列逐颗依次通过红绿激光，红激光用来判定微球的荧光编码，绿激光用来测定微球上报告分子的荧光强度。从而达到快速准确的定量检测目的。

  技术平台优势     

速度/高通量：每个微球都是一个单独的测试，因此可以用有限的样本同时进行大量不同的生物测定和分析。30s即可对1个样本完成27种HPV亚型的分析，对每个样本中的每个亚型均完成50次以上的检测分析。

应用广泛：基于xMAP技术可以实现多种不同的应用，包括核酸、抗原抗体结合、酶、受体和其他蛋白质相互作用。如HPV DNA，肿瘤标志物，TORCH等。

精确性：单管反应， xMAP技术对结果进行实时分析和精确量化。

重现性：在一个批次内大量生产xMAP微球，允许在分析生产过程中进行分析标准化和可选的多重质量控制（QC）步骤，这是固相平面阵列无法提供的。
同行信赖：来自科学同行的50,000多篇出版物，涵盖了广泛的研究领域。

多个国际HPV试剂品牌采用Luminex分型验证其HPV分型的特异性。

1. 罗氏[2]：HPV16/18分型试剂盒，采用Luminex基因分型为对照，评价了Cobas 4800 HPV型别的特异性。

2.美国碧迪[3]：HPV高危拓展分型试剂盒，采用Luminex基因分型为对照，评价了BD onclarity HPV检测的型别特异性。

3. 德国艾迪[4]：HPV全分型试剂盒，PCR+杂交检测，29种HPV亚型，采用Luminex进行多重基因分型（MPG）对试剂HPV分型进行验证。

透景生命在2003年将Luminex核心技术xMAP®技术引入中国，立足国内大样本人群研究数据，研发并推出了“人乳头瘤状病毒核酸分型检测试剂盒”，一管反应，对27种HPV亚型进行分型检测。立足本土国情，国际认可的HPV分型检测技术，你不来试试吗？

参考文献：

[1] Mario Poljak, Boštjan J. Kocjan, Anja Oštrbenk,等. Commercially available molecular tests for human papillomaviruses (HPV): 2015 update[J]. Journal of Clinical Virology, 2016.[2] Clinical validation of the Cobas 4800 HPV assay using cervical samples in SurePath medium under the VALGENT4 framework. Journal of Clinical Virology.2020, 128. 104336.[3] Clinical and analytical performance of the BD Onclarity HPV assay with SurePath screening samples from the Danish cervical screening program using the VALGENT framework. J Clin Microbiol.2020, 58:e01518-19.[4] Analytical Evaluation of the Human Papillomavirus HPV DNA Array E1-Based Genotyping Assay. Intervirology.2019, 62. 1-1