化学发光试剂盒的使用方法有哪些？

发布日期：2022-07-07 作者：点击：

800彩票化学发光试剂盒是一种超敏ECL化学发光试剂盒，本产品与二抗上偶联的辣根过氧化物酶发生化学反应，发出萤光，从而可以通过用X光片压片或其它适当化学发光成像设备检测样品。

ECL化学发光试剂盒是用于检测HRP或其标记产物的化学发光试剂，可用于western blot或ELISA等实验的检测。分为普通型ECL化学发光试剂盒（高质量鲁米诺底物，检测灵敏度10-100pg HRP）和增强型ECL化学发光试剂盒（采用更稳定、发光量子产率更高的反应底物，检测灵敏度1pg HRP）。两款试剂盒发光强度均可以稳定持续30min以上。

化学发光试剂

化学发光试剂盒

原理：

800彩票超敏型ECL化学发光底物试剂盒用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶（HRP）的抗体、抗原或者核酸。蛋白质或核酸在电泳后转移到印迹膜上，以HRP标记的抗体或探针结合膜上的目的蛋白或核酸，洗膜后置于用本产品配制的ECL工作液中，室温孵育数分钟，HRP使工作液中的鲁米诺（Luminol）氧化并发光，试剂中添加的增强剂可以使得这种发光大大增强。此光经X光胶片或者电子装置感光记录下来，可清晰显示蛋白质或核酸条带。

使用方法：

800彩票1.印迹膜制备：执行常规电泳、转膜、HRP标记的抗体或者HRP标记的核酸探针孵育、洗膜；ECL工作液含有HRP催化的发光底物，检测系统必须基于HRP酶标记的抗体或者核酸探针。充分的洗涤对于降低背景非常重要，所有步骤均在室温下完成。

2.ECL工作液的配置：在使用前取等量A液和B液，混合均匀并尽快使用；将膜片置混合液中，于室温下孵育约1分钟，每平方厘米膜片至少使用0.1-0.2 ml以覆盖全膜片，注意不要在膜片表面形成气泡。

800彩票3.蛋白或核酸信号显现：

1).用平头镊钳住膜片，垂直置于吸水纸上以吸去过量试剂，仅留下少量液体覆盖表面，不可让膜完全干燥；

800彩票2).将膜片置于保鲜膜上，吸附蛋白面朝上，小心赶尽气泡；

800彩票3).用电子装置感光，或在暗室中用X光片曝光；

4).根据信号强弱适当调整曝光时间，也可选择不同时间多次曝光，以取得更佳效果。