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1、目的：
对微生物标准菌株的验收、复活、确认、转代、储存、使用、废弃等进行规定，确保标准菌株符合要求，保证检测结果。
2、职责：
2.1、检测中心主任负责标准菌株资源的配备。
2.2、微生物检测室工作人员负责标准菌株的有效储存和正确的使用。
3、要求：
3.1、供应商的选择：选择有资质的标准菌株的合格供应商，每批标准菌株必须有附件的供应商的合格证或检测报告，来证明所采购的标准菌株是合格的。
3.2、标准菌株和验收
菌株一到实验室，一定要记录好菌株号和标准菌株来源，确保溯源性清楚。同时，还应尽可能多的菌株信息，如：标准菌株名称和数量、生产日期、接收日期和有无破损等。
3.3、冻干标准菌株的复活：
3.3.1、开启产品包装：先用70%酒精棉擦拭外包装，从凹口处撕开产品外包装，撕掉标签上的拉片，将其贴于菌株保藏管上。
3.3.2、复活：选择合适的培养基和培养条件（根据生产商说明）进行复活。冻干菌株的传代次数不得超过5代，从标准菌株保藏中心购买的冻干标准菌株为第F0代。捏管帽处安瓿瓶（仅一次）使其释放水合液体。垂直握住安瓿瓶并轻拍之，使液体流入含小球的管底。通过挤捏压碎小球使其与液体混合，立马上拭子浸于水合液体。挤压并旋转拭子，接种于初级培养平板，接种圈的直径约为25mm，用一无菌接种环在先前接种区域划线10~20次，促使分离出单菌落。同时吸出部分菌液接种胰蛋白胨大豆肉汤管，副溶血性弧菌接种3%氯化钠胰蛋白胨大豆肉汤管。将接种好的平板和管马上 进行培养。细菌培养温度通常为25℃或37℃。多数冻干菌株会在几天后长出，但是少数菌会表现出延滞期延长的现象，需要将正常培养时间加倍。复活后的菌株为F1代。
3.3.3、将TSB生长的浓菌液吸0.5mL于菌株保藏管充分混匀后将液体吸出，将保藏管-18℃保存1~3年为标准储备菌株F2代。将平板上生长的良好菌株接种于营养琼脂斜面（副溶血性弧菌用3%氯化钠营养琼脂）36℃培养24h当作工作菌株，为W3代，记录为F2代。
3.3.4、工作菌株确认方法及依据：
大肠杆菌的确认依照“SN 0169-1992出口食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法”执行。
金黄色葡萄球菌的确认依照“SN/T 0172-2010进出口食品中金黄色葡萄球菌检验方法”执行。
沙门氏菌的确认依照“SN 0170-1992出口食品沙门氏菌属（包括亚利桑那菌）检验方法”执行。
副溶血性弧菌的确认依照“SN/T 0173-2010进出口食品中副溶血性弧菌检验方法”执行。
3.4、工作菌株的储存：
3.4.1、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、储存在2℃~8℃的冰箱内。
3.4.2、副溶血性弧菌在常温条件下保存。
3.4.3、储存期限：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、副溶血性弧菌为3个月。
3.5、标准菌株的转接：
3.5.1、标准菌株的复苏：
① 菌种操作应在无菌条件下进行，防止杂菌污染。
② 每次使用和复苏时只需将小珠在平板上滚动或置肉汤中培养。
3.5.2、标准储备菌株每转接一次须进行确认。
3.5.3、工作菌株转接的方法：
① 配制营养琼脂培养基（副溶血性弧菌加3%氯化钠）并分装在试管内，121℃高压灭菌15分钟后摆斜面，冷却后备用。
② 在无菌条件下，用接种环挑取菌苔至新奇斜面上作“之”字形划线接种，放置在36℃的培养箱内培养24小时。
3.6、工作菌株的使用：
3.6.1、内部质量操纵 ：一个月一次阳性对比 、培养基每批验收；
3.6.2、外部质量操纵 ：能力验证、实验室比对。
3.7、工作菌株的期间核查：
3.7.1、期间核查的频率：每半年对使用标准菌株进行一次期间核查。
3.7.2、工作菌株期间核查的方法及依据：同工作菌株的确认。
3.7.3、建立标准菌株期间核查记录。
3.8、标准菌株的废弃：
3.8.1、标准菌株如已老化、退化、或变异、污染等，经确认试验不符合的或该菌种已无使用需要的应及时销毁。
3.8.2、废弃的标准菌株由部门负责人批准，使用人员放入高压锅内121℃30min高压灭菌后作为废弃物处理。
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